高電壓電泳儀在操作時要引起注意的一些事項
更新時間:2020-09-03 點擊次數(shù):2029
高電壓電泳儀在操作時要引起注意的一些事項
高電壓電泳儀是實現(xiàn)電泳分析的儀器,一般由電源、電泳槽、檢測單元等組成。它裝有定時器,恒壓或恒流輸出,以及一個全新的暫停/繼續(xù)功能,能使您在運行時改變已編程的參數(shù)而無須重新設(shè)定時間。它的光滑表面,橡膠按鍵以及綠色透明機箱的設(shè)計,與其操作簡便的特點一樣。
電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究*的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類,自由界面電泳不需支持物,如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。而區(qū)帶電泳則需用各種類型的物質(zhì)作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等,分子生物學(xué)領(lǐng)域中常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對不同物質(zhì)進行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M行組份分析或單個組份提取制備,這在臨床檢驗或?qū)嶒炑芯恐芯哂兄匾囊饬x。高電壓電泳儀正是基于上述原理設(shè)計制造的。
它對進樣技術(shù)要求很高,進樣操作事項如下:
1、進樣區(qū)帶越小越好:無論采用何種進樣方式,插入樣品溶液的深度一般要少于總長度的1%~2%,以盡量減少樣品溶液經(jīng)毛細(xì)吸附進入而影響進樣量的性。樣品管中溶液少為5μL,進樣體積為1~50nL。
2、進樣時間以短為宜:通常進樣時間為0.5~1s,此時粘附的樣品量相對于吸入的體積可忽略不計。雖然電泳的進樣時間可至±0.1s,但由于插入樣品管時不可避免地會粘附一些溶液,進樣時間過短會影響分析的重復(fù)性。
3、樣品預(yù)濃縮:受總體積的制約,對于濃度很稀的樣品,高電壓電泳儀不能象HPLC那樣可加大進樣量來提高檢測靈敏度,但可采取一些措施來改善。